Produktet

CTP:fosfokolin citidiltransferaza α (CCTα) është një enzimë bërthamore që katalizon hapin kufizues të shpejtësisë në rrugën CDP-kolinë për sintezën e fosfatidilkolinës (PC).Aktivizimi i lipideve i CCTα rezulton në zhvendosjen e tij në mbështjellësin bërthamor dhe zgjerimin e një rrjeti membranor intranuklear të quajtur retikulumi nukleoplazmatik (NR) nga një mekanizëm që përfshin deformimin e membranës.Laminat bërthamore kërkohen gjithashtu për stabilitetin dhe përhapjen e NR, por nëse kjo strukturë unike, ose lamina bërthamore në përgjithësi, kërkohet për sintezën e PC-së nuk dihet.Për të ekzaminuar këtë marrëdhënie, lamina bërthamore u varfërua nga ARNi ose u ndërpre nga shprehja e sindromës Hutchinson-Gilford progeria (HGPS) mutant lamin A (progerin), dhe u analizua efekti në metabolizmin CCTα dhe kolinë.Heshtja e ndërmjetësuar nga siRNA e lamin A/C ose lamin B1 në qelizat CHO për të zvogëluar NR-në nuk pati asnjë efekt në sintezën e PC-së, ndërsa rrëzimi i dyfishtë pengoi në mënyrë jo specifike shtegun.Duke konfirmuar rolin e tij të vogël në sintezën e PC, vetëm 10% e kolinës/etanolaminës fosfotransferazës së mbishprehur në mënyrë të përkohshme u zbulua në NR.Në qelizat CHO, CCTα ishte nukleoplazmike dhe e bashkë-lokalizuar me GFP-progerin në palosjet bërthamore dhe invaginimet;megjithatë, fibroblastet HGPS shfaqën një shpërndarje jonormale të CCTα në citoplazmë dhe mbështjellës bërthamor që u shoqërua me një reduktim 2-fish në sintezën e PC.Megjithë lokalizimin e ndryshuar, eksperimentet e etiketimit të kolinës treguan se aktiviteti i CCT ishte i paprekur dhe frenimi i sintezës së PC u gjurmua në aktivitetin e reduktuar të një transportuesi kolinë të ndjeshëm ndaj hemikoliniumit.Ne konkludojmë se CCTα dhe laminat bashkëpunojnë në mënyrë specifike për të formuar NR, por struktura e përgjithshme e mbështjellësit bërthamor ka një ndikim minimal në aktivitetin CCT dhe sintezën e PC.