Produktet

LecA (PA-IL) është një lektinë citotoksike dhe adhezinë e prodhuar nga Pseudomonas aeruginosa e cila lidh galaktozidet hidrofobike me specifikë dhe afinitet të lartë.Duke përdorur një fuzion përkthimi lecA-egfp dhe analizë imunoblot të matricës jashtëqelizore të biofilmit, ne tregojmë se lecA shprehet në qelizat e rritura në biofilm.Në analizat statike të biofilmit si në polistiren ashtu edhe në çelik inoks, thellësia dhe mbulimi i sipërfaqes së biofilmit u reduktua nga mutacioni i lecA dhe u rrit në shtamin PAO-P47 që prodhon shumë LecA.Mbulimi i sipërfaqes së biofilmit nga lloji mëmë, PAO-P47 por jo mutant lecA në kuponat e çelikut u pengua gjithashtu nga rritja në prani të izopropil-beta-D-tiogalaktozidit (IPTG) ose p-nitrofenil-alfa-D-galaktozidit ( NPG).Për më tepër, biofilmat e pjekur të tipit të egër të formuar në mungesë të këtyre galaktozideve hidrofobike mund të shpërndahen me shtimin e IPTG.Në të kundërt, shtimi i p-nitrofenil-alfa-L-fukozës (NPF) i cili ka një afinitet të lartë për lektin e P. aeruginosa LecB (PA-IIL) nuk pati asnjë efekt në formimin ose shpërndarjen e biofilmit.Rritja planktonike e P. aeruginosa PAO1 ishte e pandikuar nga prania e IPTG, NPG ose NPF, dhe as lloji nuk ishte në gjendje t'i përdorte këto sheqerna si burime karboni, duke sugjeruar që efektet e vëzhguara në formimin e biofilmit ishin për shkak të frenimit konkurrues të ligandit LecA. detyruese.Rezultate të ngjashme u morën gjithashtu për biofilmat e rritur në kushte dinamike të rrjedhës në kuponat e çelikut, duke sugjeruar që LecA kontribuon në arkitekturën e biofilmit P. aeruginosa në kushte të ndryshme mjedisore.

Një alfa-L-fukozidazë (EC 3.2.1.51) e aftë të çlirojë mbetjen t-fukosil nga zinxhiri anësor i oligosakarideve ksiloglukan është zbuluar në gjethet e bimëve Arabidopsis.Për më tepër, një alfa-L-fukozidazë me specifikë të ngjashme substrati u pastrua nga gjethet e lakrës (Brassica oleracea) për të dhënë një brez të vetëm në SDS-PAGE.Dy sekuenca peptide u morën nga kjo grup proteinash dhe ato u përdorën për të identifikuar një gjen Arabidopsis që kodon për një alfa-fucosidase që ne propozojmë ta quajmë AtFXG1.Përveç kësaj, është gjetur edhe një gjen Arabidopsis me homologji me alfa-L-fukozidazat e njohura, dhe ne propozuam ta emërtonim si AtFUC1.Të dy AtFXG1 dhe ATFUC1 u shprehën në mënyrë heterologjike në qelizat Pichia pastoris dhe aktivitetet alfa-L-fucosidase sekretohen në mjedisin e kulturës.Alfa-L-fukozidaza e koduar nga AtFXG1 ishte aktive kundër oligosakarideve nga ksiloglukani XXFG si dhe kundër 2'-fukosil-laktitolit, por jo kundër p-nitrofenil-alfa-L-fukopiranozidit.Megjithatë, AtFUC1 i shprehur në mënyrë heterologjike ishte aktiv vetëm kundër 2'-fukosil-laktitolit.Kështu, e para duhet të lidhet me metabolizmin e ksiloglukanit.