Produktet

Mycobacterium tuberculosis mund të vazhdojë për dekada në bujtësin e njeriut.Rrugët e rrepta të reagimit që përfshijnë polifosfatin inorganik [poli(P)], i cili sintetizohet dhe hidrolizohet nga polifosfat kinaza (PPK) dhe ekzopolifosfataza (PPX), respektivisht, besohet se luajnë një rol kyç rregullator në qëndrueshmërinë bakteriale.Ne tregojmë këtu se akumulimi i poli(P) të M. tuberculosis është i lidhur përkohësisht me kufizimin e rritjes bacilare.Ne identifikojmë gjithashtu M. tuberculosis Rv1026 si një ekzopolifosfatazë të re me aktivitet hidrolitik kundër poli(P) me zinxhir të gjatë.Duke përdorur një sistem shprehjeje të nxitur nga tetraciklina për të rrëzuar shprehjen e Rv1026 (ppx2), ne zbuluam se akumulimi i poli(P) të M. tuberculosis çon në rritje të ngadalësuar dhe reduktim të ndjeshmërisë ndaj izoniazidit, rritje të rezistencës ndaj nxehtësisë dhe pH acid, dhe rritje të mbijetesës ndërqelizore. gjatë infeksionit të makrofagëve.Me anë të mikroskopit elektronik të transmetimit, tendosja ppx2 ka shfaqur rritje të trashësisë së murit qelizor, e cila u shoqërua me reduktimin e përshkueshmërisë së murit qelizor ndaj ilaçeve hidrofile në vend të induksionit të pompave të rrjedhjes së drogës ose formimit të ndryshuar të biofilmit në lidhje me kontrollin e vektorit bosh.Analiza transkriptomike dhe metabolike zbuloi një ulje metabolike të rënies së ppx2 të karakterizuar nga reduktim i transkriptimit dhe përkthimit dhe një ulje e niveleve të glicerol-3-fosfatit.Në përmbledhje, poli(P) luan një rol të rëndësishëm në kufizimin e rritjes së M. tuberculosis dhe uljen e metabolizmit dhe kontribuon në tolerancën ndaj antibiotikëve nëpërmjet ndryshimit të përshkueshmërisë së murit qelizor. )ppGpp, besohet se ndërmjetëson qëndrueshmërinë e Mycobacterium tuberculosis.Në këtë studim, ne identifikuam një enzimë të re (Rv1026, PPX2) përgjegjëse për hidrolizimin e poli(P) me zinxhir të gjatë.Një shtam M. tuberculosis i modifikuar gjenetikisht i mangët në gjenin ppx2 tregoi nivele të rritura të poli(P), të cilat u shoqëruan me ndalimin e hershëm të rritjes bakteriale dhe uljen e ndjeshmërisë ndaj ilaçit të linjës së parë isoniazid, si dhe rritje të mbijetesës bakteriale gjatë ekspozimit ndaj stresit. kushtet dhe brenda makrofagëve.Në lidhje me shtamin e kontrollit, mutant tregoi rritje të trashësisë së murit qelizor dhe ulje të përshkueshmërisë së ilaçit.Shprehja globale e gjeneve dhe analiza e metabolitit zbuluan shprehje të reduktuar të makinerisë transkriptuese dhe përkthimore dhe një ndryshim në përdorimin e burimit të karbonit.Në përmbledhje, rregullimi i ekuilibrit të poli(P) është kritik për formimin e vazhdueshëm në M. tuberculosis.