Produktet

Diferencimi i fibroblasteve orbitale në adipocite të maturuara dhe akumulimi i mëpasshëm i indit dhjamor është treguar në progresionin e orbitopatisë së Graves (GO).Autofagjia është e përfshirë në adipogjenezë, por pak dihet për rolin e autofagjisë në fillimin dhe përparimin e GO.Qëllimi i këtij studimi është të hulumtojë rolin e autofagjisë në patogjenezën e GO. Janë analizuar eksplante dhjamore/indi lidhor orbital nga pacientë me GO dhe nga subjekte normale, si dhe fibroblaste orbitale të izoluara.Adipogjeneza u shkaktua duke përdorur medium diferencues me ose pa peroksid hidrogjeni, dhe autofagjia u manipulua duke përdorur bafilomycin A1 dhe ARN (shRNA) të shkurtër të synuar nga Atg5.Autofagozomet u identifikuan me mikroskop elektronik.Shprehja e gjeneve të lidhura me autofagjinë dhe faktorët e transkriptimit të lidhur me adipogjenezën u analizuan nga reaksioni zinxhir i transkriptimit të kundërt-polimerazë në kohë reale dhe/ose analiza Western blot.Akumulimi i pikave të lipideve u ekzaminua me ngjyrosjen Oil Red O. Vakuolat autofagjike ishin më të bollshme në qelizat GO sesa në qelizat jo-GO (p<0.05).Shprehja e gjeneve të lidhura me autofagjinë ishte dukshëm më e lartë në indet dhe qelizat GO sesa në homologët e tyre jo-GO, respektivisht.Interleukin-1β rriti proteinën LC3-II, p62 dhe Atg7 në qelizat GO.Akumulimi i autofagozomit u shfaq në ditën e 4 të adipogjenezës dhe u ul në ditën e 10-të, së bashku me formimin e pikave të lipideve.Shprehja e proteinave LC3 dhe p62 u rrit brenda 48 orëve nga diferencimi dhe u zvogëlua gradualisht nga dita 4 në 10. Trajtimi me Bafilomycin A1 dhe rënia e Atg5 nga shRNA frenuan akumulimin e pikave të lipideve dhe shtypën shprehjen e shënuesve adipogjenë. Autofagjia u rrit në indet dhe qelizat GO në krahasim me indet dhe qelizat jo-GO, duke sugjeruar që autofagjia luan një rol në patogjenezën e GO.Manipulimi i autofagjisë mund të jetë një objektiv terapeutik për GO.