ONPG CAS:369-07-3 98,0% Minim i Bardhë në Jashtë -Pluhur i bardhë
| Numri i Katalogut | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| Emri i produktit | ONPG (2-Nitrofenil-beta-D-galaktopiranozid) |
| Formula molekulare | C12H15NO8 |
| Peshë molekulare | 301,25 |
| Detajet e ruajtjes | 2 deri në 8 °C |
| Kodi tarifor i harmonizuar | 29400000 |
Specifikim produkti
| Pastërtia (HPLC) | Min.98.0% |
| Pamja e jashtme | Pluhur i bardhë në të bardhë |
| Zgjidhje(1% në ujë) | Zgjidhje e qartë, pa ngjyrë deri në pak të verdhë |
| Përmbajtja e ujit(Karl Fisher) | Maks.0.5% |
| Rrotullimi optik specifik [α]D20(c=1, H2O) | - 65,0 ° C deri -73,0 ° C |
Diskutim mbi testin ONPG (testi i β-galaktozidazës)
Kohët e fundit janë ngritur shpesh pyetjet: 1. Pse mund të përdoret testi ONPG për të dalluar fermentimin e vonuar të laktozës?2. Pse standardi kombëtar thotë se është e nevojshme të përdoret 3% klorur natriumi trisaharid hekuri (ose hekuri trisaharid) për testin ONPG?3. Për Vibrio parahaemolyticus, gjatë kryerjes së testit OPNG, pse duhet të shtohet tolueni me pika sipas standardit?Cili është funksioni?
Kompania jonë ka shqyrtuar shumë informacione, i ka përmbledhur dhe i ka ndarë me ju më poshtë:
Parimi: Emri kinez i ONPG është o-nitrobenzene-β-D-galaktopiranoside.ONPG mund të hidrolizohet në galaktozë dhe o-nitrofenol të verdhë (ONP) nga β-galaktozidaza, kështu që aktiviteti i β-galaktozidazës mund të zbulohet nga ndryshimi i ngjyrës së mjedisit të kulturës.
Laktoza është një sheqer që shumica e mikroorganizmave duhet të zbulojnë.Metabolizmi i tij kërkon dy enzima, njëra është permeaza qelizore, laktoza hyn në qeliza nën veprimin e permeazës;tjetra është β-galaktozidaza, e cila hidrolizon laktozën në galaktozë.Laktoza dhe glukoza.β-galaktozidaza gjithashtu mund të veprojë drejtpërdrejt në ONPG për ta hidrolizuar atë në galaktozë dhe o-nitrofenol të verdhë (ONP).Mund të bëhet në 24 orë, edhe me fermentues me vonesë të laktozës.Prandaj, ai shpjegon rezultatet e vëzhgimit të marrjes së kulturës 1 nga pjerrësia e agarit dhe inokulimit të saj në një rreth të plotë në 36°C për 1-3 orë dhe 24 orë.Nëse prodhohet β-galaktozidaza, ajo do të zverdhet në 1-3 orë, nëse nuk ka një enzimë të tillë, ajo nuk do të ndryshojë ngjyrën në 24 orë.
Sipas dy enzimave të mësipërme, mikroorganizmat mund të ndahen në kategoritë e mëposhtme:
1 bakter laktozë-fermentues (18-24 orë) me permeazë dhe β-galaktozidazë P + G +;
2 Fermentues të vonuar të laktozës (që zgjasin më shumë se 24 orë) të cilëve u mungon permeaza, por posedojnë galaktozidazë: P-G+.
3 Fermentues jo-laktozë të cilëve u mungon permeaza dhe galaktozidaza: P-G-.
Testi ONPG mund të përdoret për të dalluar bakteret e fermentimit të laktozës (P-G+) nga bakteret e laktozës jofermentuese (PG-), të tilla si:
1 Diferenconi fermentuesit e vonë të laktozës (P-G+) nga fermentuesit jo-laktozë (P-G-).
(a) Citrobacter (+) dhe Salmonella arizonae (+) nga Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) nga Shigella sonnei (-).
Pse u krye analiza ONPG duke përdorur një kulturë gjatë natës në trisakarid ferrik 3% klorur natriumi (trisakarid hekuri)?Kompania jonë ka konsultuar shumë informacione, por nuk ka një deklaratë të qartë.Vetëm në faqen e internetit të FDA-së, shkruhet se "Inokuloni kulturat që do të testohen në pjerrësi të agarit të trefishtë të sheqerit dhe inkuboni për 18 orë në 37°C (ose temperaturë tjetër të përshtatshme, nëse kërkohet). Mund të përdoret gjithashtu % laktozë."do të thotë: bakteret testuese u inokuluan në mjedisin e hekurit trisakarid dhe u kultivuan në 37°C për 18 orë.Pjerrësia e agarit ushqyes (ose medium tjetër) që përmban 1% laktozë janë gjithashtu të pranueshme.Prandaj, supozohet se mediumi i hekurit trisakarid përmban laktozë.Pas rritjes gjatë natës, bakteret kanë prodhuar një β-galaktozidazë të mirë aktive.Duke përdorur baktere të tilla, ONPG mund të dekompozohet më shpejt nga β-galaktozidaza.Fenomeni eksperimental manifestohet më shpejt dhe më mirë.Përveç kësaj, shtimi me pika i toluenit dhe një banjë uji për 5 minuta janë të gjitha në mënyrë që të çlirohet plotësisht β-galaktozidaza.
