Lajme

Rreth nesh ka shumë heronj të pakënduar, që duken të zakonshëm, por në fakt në heshtje na kontribuojnë shumë.Proteinaza K është "heroi i pakënduar" në industrinë e diagnostikimit molekular, megjithëse krahasuar me "të mëdha dhe të fuqishme" në industri, proteinaza K është aq e ulët saqë e kemi anashkaluar prej kohësh rëndësinë e saj.Me shpërthimin e epidemisë së re të kurorës, kërkesa për proteinazën K është rritur dhe oferta brenda dhe jashtë vendit është shumë prapa konsumit, dhe të gjithë papritmas kuptuan se proteinaza K është kaq e rëndësishme.
Cili është përdorimi i proteinazës K
Proteinaza K është një proteazë serine me aktivitet enzimë proteolitike dhe mund të ruajë aktivitetin në një gamë të gjerë mjedisesh (pH (4-12,5), tampon me shumë kripë, temperaturë të lartë 70°C, etj.).Përveç kësaj, aktiviteti i proteinazës K nuk frenohet nga SDS, ure, EDTA, hidroklorur guanidine, izotiocianate guanidine, etj., dhe një sasi e caktuar detergjenti gjithashtu mund të rrisë aktivitetin e proteinazës K. Në trajtimin mjekësor (virusi dhe dezinfektimi mikrobial ), ushqimi (zbutja e mishit), lëkura (zbutja e flokëve), prodhimi i verës (pastrimi i alkoolit), përgatitja e aminoacideve (pendët e degraduara), nxjerrja e acidit nukleik, hibridizimi in situ etj., proteinaza K Ka aplikime.Aplikacioni më i përdorur është nxjerrja e acidit nukleik.
Proteinaza K mund të enzimojë të gjitha llojet e proteinave në kampion, duke përfshirë ato histone që janë të lidhura fort me acidet nukleike, në mënyrë që acidet nukleike të mund të lirohen nga kampioni dhe të lëshohen në ekstrakt, duke lehtësuar hapin tjetër të nxjerrjes dhe pastrimit.Në zbulimin e acidit nukleik viral, proteinaza K është një nga komponentët e rëndësishëm në tretësirën e kampionimit të virusit.Proteinaza K mund të plasaritet dhe çaktivizojë proteinën e shtresës së virusit, e cila është më e sigurt gjatë fazës së transportit dhe zbulimit;Përveç kësaj, proteinaza K gjithashtu mund të degradojë RNaza parandalon degradimin e ARN-së virale dhe lehtëson zbulimin e acidit nukleik.
Fama brenda natës e proteinazës K
Qoftë në fushën e kërkimit shkencor apo në fushën e IVD, nxjerrja e acidit nukleik është eksperimenti më themelor, kështu që proteinaza K ka qenë gjithmonë një ekzistencë shumë e rëndësishme.Sidoqoftë, në të kaluarën, proteinaza K ishte shumë më pak e njohur sesa roli i saj.Një pjesë e madhe e kësaj ishte për shkak se marrëdhënia e ofertës dhe kërkesës së proteinazës K ishte shumë e qëndrueshme.Pak njerëz do të mendonin se furnizimi me proteinazë K do të ishte problem.
Me shpërthimin e epidemisë së re të kurorës, kërkesa për testimin e acidit nukleik është rritur.Nga fundi i qershorit 2020, Kina ka përfunduar gati 90 milionë teste të reja të kurorës, dhe ky numër është edhe më alarmues në shkallë globale.Në eksperimentet e nxjerrjes së acidit nukleik, përqendrimi i punës i proteinazës K është rreth 50-200 μg/mL.Në përgjithësi, duhen rreth 100 μg proteinazë K për të nxjerrë një mostër të acidit nukleik.Në përdorimin aktual, për të rritur efikasitetin e nxjerrjes së acidit nukleik, shpesh Proteinaza K do të përdoret në një sasi të shtuar.Zbulimi i acidit nukleik të koronavirusit të ri ka sjellë një kërkesë të madhe të proteinazës K.Bilanci origjinal i ofertës dhe kërkesës së proteinazës K u prish shpejt dhe proteinaza K u bë një material i rëndësishëm parandalues ​​epidemik brenda natës.
Vështirësitë në prodhimin e proteinazës K
Megjithëse me zhvillimin e epidemisë, vlera e rëndësishme e proteinazës K është vlerësuar nga njerëzit, është e turpshme që për shkak të nivelit të ulët të tepruar të proteinazës K, pak kompani vendase janë përfshirë në prodhimin e proteinazës K. Kur njerëzit duan të krijojnë prodhimin e proteinazës K Gjatë procesit të prodhimit, u zbulua se proteinaza K është një proteinë jashtëzakonisht e veçantë.Është jashtëzakonisht sfiduese të zgjerohet kapaciteti i prodhimit të proteinazës K në një periudhë të shkurtër kohe.
Prodhimi në shkallë të gjerë i proteinazës K përballet me vështirësitë e mëposhtme
1. Shprehje e ulët
Proteinaza K mund të degradojë në mënyrë jo specifike shumicën e proteinave dhe të shkaktojë toksicitet serioz në qelizën pritëse shprehëse.Prandaj, niveli i shprehjes së proteinazës K është përgjithësisht shumë i ulët.Ekzaminimi i sistemeve të shprehjes dhe shtameve që shprehin shumë proteinazën K në përgjithësi kërkon një cikël më të gjatë.
2. Mbetjet e pigmenteve dhe acideve nukleike
Fermentimi në shkallë të gjerë sjell një sasi të madhe të pigmentit dhe mbetjeve të acidit nukleik të bujtësit.Është e vështirë të largohen këto papastërti me një proces të thjeshtë pastrimi, dhe pastrimi kompleks rrit koston dhe zvogëlon shkallën e rikuperimit.
3. Paqëndrueshmëria
Proteinaza K nuk është mjaft e qëndrueshme, mund të enzimolizohet vetë dhe është e vështirë ta ruash në mënyrë të qëndrueshme në 37°C për një kohë të gjatë pa një agjent mbrojtës.
4. Lehtë për të precipituar
Gjatë përgatitjes së pluhurit të tharë në ngrirje të proteinazës K, në mënyrë që të sigurohet që përmbajtja e ngurtë e proteinazës K në pluhurin e tharë në ngrirje është e madhe, është e nevojshme të shtohet një agjent mbrojtës i tharë në ngrirje me një përqendrim të lartë, por kur përqendrimi i proteinazës K arrin 20mg/mL e lart, është i lehtë Grumbullimi formon një precipitat, i cili sjell vështirësi të mëdha në tharjen në ngrirje të proteinazës K me përmbajtje të lartë të ngurtë.
5. Investim i madh
Proteinaza K ka aktivitet të fortë të proteazës dhe mund të hidrolizojë proteaza të tjera në laborator.Prandaj, proteinaza K kërkon zona të specializuara prodhimi, pajisje dhe personel për kërkime dhe zhvillim dhe prodhim.
Tretësira e proteinazës K XD BIOCHEM
XD BIOCHEM has a mature protein expression and purification platform, and has rich experience in the expression and purification of recombinant proteins and optimization of production processes. Through the rapid formation of a research and development team, the large-scale production process of proteinase K has been overcome. The monthly output of freeze-dried powder is more than 30 KG. The product has stable performance, high enzyme specific activity, and no host cytochrome and nucleic acid residues. Welcome to contact XD BIOCHEM Obtain a trial package (E-mail: sales@xdbiochem.com Tel: +86 513 81163739).
Zgjidhjet teknike të XD BIOCHEM përfshijnë
Duke përdorur integrimin plazmidike me shumë kopje, zgjidhen shtame me shprehje të lartë me nivel shprehjeje 8g/L, gjë që kapërcen problemin e nivelit të ulët të shprehjes së proteinazës K;
Nëpërmjet vendosjes së një procesi pastrimi me shumë hapa, mbetjet e citokromit pritës dhe të acidit nukleik të proteinazës K u hoqën me sukses nën vlerën standarde;
Nëpërmjet ekzaminimit me fuqi të lartë të formulimeve mbrojtëse të tamponit, u zgjodh një tampon që mund të ruajë në mënyrë të qëndrueshme proteinazën K në 37°C;
Tamponët e shqyrtimit kapërcejnë problemin që proteinaza K është e lehtë për t'u grumbulluar dhe precipituar në përqendrime të larta, dhe vendos themelin për tharjen në ngrirje me përmbajtje të lartë të ngurtë të proteinazës K.

Mostra e proteinazës K XD BIOCHEM

Testi i stabilitetit të proteinazës K XD BIOCHEM: nuk do të ketë ndryshim të rëndësishëm në aktivitet pas 80 ditësh në temperaturën e dhomës

Testi i stabilitetit të proteinazës K XD BIOCHEM: nuk do të ketë ndryshim të rëndësishëm në aktivitet pas 80 ditësh në temperaturën e dhomës

Krahasimi i efektit të nxjerrjes së acidit nukleik të proteinazës K XD BIOCHEM dhe produkteve konkurruese.Në procesin e nxjerrjes së acidit nukleik, përdoren përkatësisht XD BIOCHEM dhe proteinaza konkurruese K.Efikasiteti i nxjerrjes së proteinazës K XD BIOCHEM është më i lartë dhe vlera Ct e gjenit të synuar është më e ulët.