Produktet

1. Metodat e profilizimit të metabolitit janë mjete të rëndësishme për matjen e grupeve të metabolitëve në sistemet biologjike.Ndërsa shumica e metodave të profilizimit të metabolitëve raportojnë intensitet relativ ose varen nga disa standarde të brendshme që përfaqësojnë të gjithë metabolitët, kërkesa përfundimtare për një përshkrim sasior të grupit të metabolitëve në qelizat dhe lëngjet biologjike është përcaktimi absolut i përqendrimit.Ne raportojmë këtu një metodë të profilizimit të metabolitëve të synuar të kromatografisë së gazit/spektrometrisë së njëpasnjëshme të spektrit të masës me fuqi të lartë dhe të ndjeshme që mundëson kuantifikimin absolut të të gjithë metabolitëve të zbuluar.Metoda bazohet në derivatizimin dhe përcaktimin sasior të kloroformatit të metilit me spikim të mostrave me standarde metabolite të derivatuara veçmas me reagentë derivatizimi të deuteruar.Jonizimi tradicional i ndikimit të elektroneve zëvendësohet me jonizimin kimik pozitiv pasi ky i fundit në një masë shumë më të madhe ruan jonin molekular dhe fragmente të tjera me peshë të lartë molekulare.Kjo e bëri më të lehtë përzgjedhjen e tranzicioneve unike MS/MS midis shumë metabolitëve koeluting.Aktualisht, metoda e re GC/MS/MS përfshin 67 metabolitë parësorë të zakonshëm nga të cilët shumica i përkasin grupeve të aminoacideve dhe joaminoacideve organike.Ne tregojmë zbatueshmërinë e metodës në mostrat e urinës dhe serumit.Metoda është një përmirësim domethënës i metodologjisë aktuale për profilizimin sasior të metabolitëve GC/MS të aminoacideve dhe joaminoacideve organike.

2.24S-Hydroksicholesterol (24OHC) dhe 27-hydroxycholesterol (27OHC) janë dy oksisterole strukturore të ngjashme me origjinë të ndryshme - e para pothuajse ekskluzivisht e formuar në tru dhe e dyta e formuar në një masë më të vogël në tru sesa në shumicën e organeve të tjera.HIPOTEZA PËR TË TESTUAR: Dëmtimi neuronal dhe/ose demielinizimi shkakton rritje të fluksit të 24OHC nga truri në lëngun cerebrospinal (CSF), ndërsa një pengesë gjaku-tru defekt shkakton fluks të shtuar prej 27OHC nga qarkullimi në CSF. Hollimi i izotopit-masa spektrometria u përdor për të vlerësuar dy oksisterolet në CSF dhe plazmën e më shumë se 250 pacientëve me sëmundje të ndryshme neurologjike dhe geriatrike. Nivelet e CSF-së të dy oksisteroleve ishin shumë më të prekura nga sëmundjet e ndryshme sesa nivelet plazmatike.Pacientët me sëmundje demielinizuese aktive kishin nivele të rritura të 24OHC në CSF me një raport relativisht të lartë 24OHC/27OHC.Pacientët me meningjit në përgjithësi kishin nivele të larta të të dy steroideve me një raport të ulët 24OHC/27OHC.Pacientët me sëmundjen Alzheimer kishin nivele të rritura pak të 24OHC në CSF me më pak rritje në 27OHC.Pacientët me sklerozë të shumëfishtë kishin një tendencë për të pasur nivele më të larta të 24OHC gjatë periudhave aktive me një raport të lartë 24OHC/27OHC. Matjet e dy oksisteroleve në CSF dhe plazmë mund të shtojnë ndjeshëm metodat ekzistuese biokimike për vlerësimin e sëmundjeve neurologjike.