Produktet

Ne zhvilluam një sistem të ri të shpërndarjes së ARN-së ndërhyrëse (siRNA) duke përdorur një kompleks tresh me polietilenimine (PEI) dhe acid γ-poliglutamik (γ-PGA), i cili tregoi efekt heshtës dhe pa citotoksicitet.Komplekset binare të siRNA me PEI ishin afërsisht 73-102 nm në madhësinë e grimcave dhe 45-52 mV në potencialin ζ.Efekti heshtës i komplekseve siRNA/PEI u rrit me një rritje të PEI, dhe komplekset siRNA/PEI me një raport ngarkese më të madh se 16 treguan rënie të konsiderueshme të luciferazës në një linjë qelizore të kancerit të zorrës së trashë të miut që shpreh rregullisht luciferazën (qelizat Colon26/Luc).Sidoqoftë, citotoksiciteti i fortë dhe aglutinimi i gjakut u vunë re në kompleksin siRNA/Lipofectamine dhe kompleksin siRNA/PEI16.Rimbushja e komplekseve kationike me një përbërje anionike u raportua të ishte një metodë premtuese për tejkalimin e këtyre toksiciteteve.Prandaj, ne përgatitëm komplekse treshe të siRNA me PEI (raporti i ngarkesës 16) duke shtuar γ-PGA për të reduktuar citotoksicitetin dhe për të dhënë siRNA.Siç pritej, citotoksiciteti i komplekseve trenare u zvogëlua me një rritje të përmbajtjes së γ-PGA, e cila uli ζ-potencialin e komplekseve.Një efekt i fortë heshtës i krahasueshëm me kompleksin siRNA/Lipofectamine u zbulua në komplekset treshe duke përfshirë γ-PGA me një ngarkesë sipërfaqësore anionike.Përfshirja e lartë e komplekseve treshe në qelizat Colon26/Luc u konfirmua me mikrokopje fluoreshence.Pas arritjes së shkatërrimit të një gjeni të transfektuar ekzogjen, aftësia e kompleksit për të ndërmjetësuar rrëzimin e një gjeni endogjen të ruajtjes së shtëpisë, gliceraldehid 3-fosfat dehidrogjenaza (GAPDH), u vlerësua në qelizat B16-F10.Kompleksi tresh (kompleksi siRNA/PEI16/γ-PGA12) shfaqi një efekt të rëndësishëm të rrënimit të GAPDH.Kështu, ne zhvilluam një sistem të dobishëm shpërndarjeje siRNA.