Produktet

Fosfatazat e proteinave serinë/treonine janë përshkruar në shumë baktere patogjene si enzima thelbësore të përfshira në rrugët e transduksionit të sinjalit të varur nga fosforilimi dhe shpesh të lidhura me virulencën e këtyre organizmave.Një inspektim i gjenomit Mycoplasma synoviae zbuloi praninë e një gjeni (prpC) që kodon një proteinë fosfatazë të supozuar të nënfamiljes së proteinës fosfatazë 2C (PP2C).Këtu, ne raportojmë një karakterizim të plotë biokimik të M. synoviae fosfatazës (PrpC) dhe rolin e veçantë të joneve metalike në marrëdhënien strukturë-funksion të kësaj enzime.Analiza e sekuencës së aminoacideve PrpC zbuloi se të gjitha mbetjet e përfshira në qendrën e metaleve dybërthamore dhe mbetjet e supozuara jokonordinuese të metalit të tretë, të ruajtura në fosfatazat PP2C, janë të pranishme në PrpC.PrpC është një proteinë monomerike e aftë të defosforilojë fosfo-substratet me varësinë e joneve Mn(2+).Analiza e stabilitetit termik tregoi qëndrueshmërinë e enzimës në temperatura të buta dhe ndikimin e joneve Mn(2+) në këtë veti.Analiza e spektrometrisë së masës sugjeroi që tre jone metalikë lidhen me PrpC, dy prej të cilave me një konstante të dukshme me afinitet të lartë.Analiza mutacionale e mbetjeve të supozuara të koordinimit të metalit të tretë, Asp122 dhe Arg164, zbuloi se këto variante shfaqën një lidhje më të dobët të joneve të manganit dhe se të dy mutacionet ndikuan në aktivitetin e fosfatazës PrpC.Sipas këtyre rezultateve, PrpC është një pjesë e proteinës fosfatazë e varur nga metali me një stabilitet të përmirësuar në formën holo dhe me Asp122, ndoshta i implikuar në vendin e tretë të lidhjes së metalit, thelbësor për aktivitetin katalitik.